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Pfu DNA 聚合酶
    发布时间: 2013-12-10 22:29    
Pfu DNA 聚合酶  5U/ul
Pfu DNA 聚合酶

   Pfu DNA 聚合酶  

   

  本酶为Pyrococcus furiosus中分离的pfu DNA pol 基因在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。Pfu DNA聚合酶具有3’-5’外切酶(校正)活性,当聚合反应发生碱基错配时,聚合酶的校正活性可将错配的碱基切除。Pfu DNA聚合酶为使用范围最广的高保真DNA聚合酶,其错误率仅为1.3x10-6,推荐Pfu DNA聚合酶用于需高保真的PCR反应。  

  用途  

  用于要求保真度比较高的PCR反应,包括克隆PCRDNA片段拼接、引入突变、全基因合成等。  

  特点  

  高保真:Pfu DNA聚合酶是使用最广泛的高保真酶,其保真度为普通Taq酶的10倍。  

  灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。  

  快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配置。  

  便利:10μl, 25μl 50μl体系全部适用。  

  质量  

  经多次柱纯化,SDS-PAGE检测纯度大于95%
 PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。
 
   

  Pfu DNA 聚合酶使用建议  

  Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端,无3’"A"突出,其PCR产物的克隆有两种方案。  

  1. PCR前引物进行5’端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中。  

  2. 将产物3’末端加A后再与T-Vector连接。  

  3. 由于Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3′端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度,理想的引物长度为20-30碱基。另外为了减少由3′-5′外切酶活性引起的引物降解,尽量在冰上配置反应体系,并最后加入Pfu酶。  

   

   

 

                   

  编号  

   

  名 称  

   

  规格  

   

  价格